Hay varios factores que influyen
en la obtención de plantas sanas por cultivo o microinjerto de ápices
caulinares in vitro.
El tipo de patógeno es muy
importante. Las bacterias endógenas, fitoplasmas y micoplasmas son muy fáciles
de eliminar, debido a que su gran tamaño relativo hace difícil que puedan
infectar las células de los ápices. La eliminación de virus y viroides es más
difícil, pero existe una gran variabilidad en los resultados. Algunos son muy
fáciles de eliminar y prácticamente el 100% de las plantas obtenidas están
sanas, pero otros son muy difíciles y sólo se eliminan de un pequeño porcentaje
de las plantas obtenidas. Probablemente estas diferencias están relacionadas
con la mayor o menor facilidad de estos patógenos de moverse de célula a célula
en los tejidos del huésped. Este factor es también probablemente responsable de
que un mismo patógeno sea más fácil de eliminar en unos clones que en otros de
una misma especie.
Las c o n d i c i o n e s óptimas
de cultivo que favorezcan la formación de brotes vigorosos favorecen la eliminación
de patógenos. La temperatura de cultivo de las plantas es muy importante. El cultivo
de las plantas infectadas a temperaturas altas dificulta la replicación y
movimiento de los patógenos termosensibles, por lo que se facilita su
eliminación. Temperaturas de 30-32∞C durante 2-3 semanas pueden ser suficientes
para incrementar de forma muy importante la incidencia de eliminación de algunos
patógenos, e incluso tratamientos de termoterapia seguidos de cultivo o
microinjerto de ápices se utilizan rutinariamente en algunos programas.
El tamaño del ápice juega un
papel importante en la eliminación de pató-genos. El aumento de tamaño
incrementa el porcentaje de regeneración y de prendimiento, pero reduce la proporción
de plantas sanas obtenidas. En consecuencia, es necesario en cada caso adoptar
una solución de compromiso que permita obtener unos resultados aceptables en
ambos parámetros El costo, el tiempo requerido y la dificultad de las técnicas
de cultivo in vitro y de diagnóstico de patógenos
son los aspectos que deben considerarse para la decisión del tamaño de ápice a
utilizar en los programas rutinarios. Por ejemplo, para el saneamiento de
cítricos por microinjerto se recomienda la utilización de un ápice compuesto
por el meristemo apical y tres primordios foliares, con una longitud de 0'1 a
0'2 mm. Con este tamaño se puede obtener alrededor de un 50% de prendimiento y
más del 90% de eliminación de patógenos.
Bibliografia
- http://www.ivia.es/sdta/pdf/revista/citricos/17tema11.pdf
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