Bibliografía
- http://es.scribd.com/doc/16584088/Tecnicas-de-cultivo-in-vitro-de-plantas
lunes, 29 de octubre de 2012
2.3.2.4 CONDICIONES DE CRECIMIENTO DE LA PLANTA
2.3.2.3 EDAD DE LA PLANTA
EDAD DE LA PLANTA
·
Edad y estado de desarrollo de la planta.- En la mayoría de los casos,
la formación de raíces se induce mucho más fácilmente en plantas juveniles que en plantas
adultas. Los vástagos regeneran más fácilmente cuando
se toman de la parte basal de un árbol, debido a que esta zona es la que posee
el carácter juvenil. La capacidad regenerativa de los cotiledones es
generalmente mucho más elevada
que la de las hojas que se pueden formar mas tarde. El primer par de hojas de
un vástago rejuvenecido es capaz de regenerar más rápidamente que las hojas subsiguientes.
BIBLIOGRAFIA
- http://www.biblioteca.org.ar/libros/150405.pdf
2.3.2.2 FITOSANIDAD
FITOSANIDAD
Obtención de plantas con sanidad controlada.
Es muy común la utilización del cultivo de tejidos para la obtención de plantas
libres de virus. El explante ideal para ello es el meristema (dependiendo de la
especie, de 0,2-0,5mm de longitud) consistente del domo y de un par de
primordios foliares.
Para evitar y/o minimizar las contaminaciones de los cultivos con microorganismos es necesario:
Para evitar y/o minimizar las contaminaciones de los cultivos con microorganismos es necesario:
1) Conocer el material vegetal con que se trabaja
y los posibles contaminantes especí- ficos.
2) Realizar una adecuada
preparación de la planta dadora de explantes, cultivándola preferentemente en
invernaderos tratadas con productos químicos que eliminen patógenos y
eventuales microorganismos endófitos.
3) Proceder a la desinfección
superficial de los explantes mediante el uso de compuestos químicos con el
objeto de eliminar los microorganismos con el menor daño posible para el
explante. Si bien no es posible recomendar un procedimiento general, se puede
señalar que el procedimiento más popularizado consiste en una doble desinfección
mediante la inmersión de los explantes en etanol (70%v/v) durante 20-60
segundos seguido de hipoclorito de sodio 1 -3%, contenido en el agua de
lavandina comercial, durante 3 a 30 minutos, dependiendo de la naturaleza del explante.
Algunos procedimientos se basan en el empleo de únicamente etanol o de hipoclorito
de sodio. Finalmente, es necesario eliminar los restos de estos productos
mediante varios lavados con agua destilada estéril.
BIBLIOGRAFIA
- http://www.biblioteca.org.ar/libros/150405.pdf
2.3.2.1 GENOTIPO
• Obtención de híbridos
interespecí-ficos. Una de las primeras aplicaciones del cultivo de tejidos en
la agricultura lo constituyó su empleo como ayuda para la obtención de híbridos
derivados de cruzamientos interespecíficos, donde se produce el aborto temprano
de embriones. En estos casos, el explante cultivado es el embrión cigótico en estadios
tempranos de su desarrollo. Con la misma finalidad también se utilizan ovarios u
óvulos fecundados.
• Obtención de plantas de
semillas con embriones rudimentarios. Para esta finalidad los explantes pueden
ser semillas (por ej. orquídeas) o bien, se aíslan los embriones en un estado
temprano de desarrollo («corazón») como en el caso de yerba mate o de algunas
variedades de duraznero.
• Obtención de plantas haploides
(considerando como haploide a un esporofito que contiene el complemento
gamético de cromosomas). En este caso, los explantes más utilizados son las
anteras, aunque también pueden emplearse microsporas aisladas, óvulos y ovarios
no fertilizados.
• Inducción de variación
somaclonal. En este caso se pueden utilizar varios explantes, pero si la
finalidad de su utilización es la aplicación en planes de mejoramiento genético
de plantas, los explantes utilizados deben posibilitar la regeneración de
plantas enteras.
BIBLIOGRAFIA
- http://www.biblioteca.org.ar/libros/150405.pdf
2.3.2 SELECCIÓN DE PLANTAS MADRES
SELECCIÓN DE PLANTAS MADRES
Las plantas madres son aquellas
de las cuales se obtienen material vegetativo para ser empleado en la siembra. Pueden
ser plantas en producción de pimienta en parcelas de agricultores o plantas
preparadas exclusivamente para producir dicho material.
BIBLIOGRAFIA
- http://www.biblioteca.org.ar/libros/150405.pdf
2.3 ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO DE TEJIDOS (INCLUYE LOS SUBTEMAS DE ESTE PUNTO)
2.3.1 ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO DE TEJIDOS
El cultivo in
vitro consiste en tomar una porción de una planta (a la que se denominará
explanto, como por ej. el ápice, una hoja o segmento de ella, segmento de
tallo, meristema, embrión, nudo, semilla, antera, etc.) y colocarla en un
medio nutritivo estéril (usualmente gelificado,
semisólido) donde se regenerarán una o muchas plantas.
La formulación
del medio cambia según se quiera obtener un
tejido des diferenciado (callo), crecer yemas y raíces, u obtener
embriones somáticos para producir semillas artificiales.
El éxito en la
propagación de una planta dependerá de la posibilidad de expresión de la
potencialidad celular total, es decir,
que algunas células recuperen su
condición meristemática. A tal fin, debe inducirse primero la des
diferenciación y luego la
rediferenciación celular. Un
proceso de este tipo sucede durante la formación de las raíces adventicias en
el enraizamiento de estacas, la formación de yemas adventicias, o cuando se
busca la propagación de begonias, violeta africana (ver figura 1) opeperonias
mediante porciones de hojas. Uno de los factores más importantes a tener en
cuenta para lograr la respuesta morfogenética deseada es la composición del
medio de cultivo.
PASOS NECESARIOS PARA GENERAR PLANTAS A PARTIR DE EXPLANTOS AISLADOS (Incluye los puntos 2.3.1.1 - 2.3.1.2 - 2.3.1.3 - 2.3.1.4)
En los
protocolos utilizados durante el cultivo
in vitro se pueden distinguir las siguientes etapas
(sintetizadas en la Figura 3):
2.3.1.0 ELECCIÓN de la planta y/o tejido donante
de explantos.
Características:
1.- Sanidad
2.- Que sean plantas herbáceas
3.- Edad del explante
4.- Genotipo5.- Época del año
6.- Edad de la planta
7.- Efecto posición y competencia
2.3.1.1 ESTABLECIMIENTO, que consiste en la
desinfección de los explantos (generalmente con hipoclorito de sodio) y su
posterior adaptación al medio artificial
de modo de inducir callo, brote, raíz o embrión
somático según se desee.
2.3.1.2 MULTIPLICACIÓN, para generar una masa vegetal suficiente para la
regeneración del número de plantas
necesarias.
2.3.1.3 ENRAIZAMIENTO, en la que se busca la formación de
raíces con el fin de convertir los brotes o embriones somáticos en plántulas completas.
2.3.1.4 RUSTICACIÓN, que es la aclimatación
de las plántulas obtenidas in vitro a las
condiciones ambientales ex vitro (suelo o algún sustrato inerte).
El éxito de la
técnica depende de muchos factores, entre ellos la edad de la planta (a mayor
edad, menor potencial de regeneración),
el genotipo y las condiciones ambientales. Entre las ventajas del cultivo in
vitro de material vegetal, se pueden incluir los tiempos más cortos, y la posibilidad
de ocupar un espacio mucho más pequeño que si se desea propagar material en tierra.
BIBLIOGRAFIA:
- http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Cultivos%20celulares%20II%20Euge.pdf
viernes, 19 de octubre de 2012
(RESUMEN PREMIO NOBEL)John B. Gurdon y Shinya Yamanaka premio Nobel de Medicina por estudios con células madre
John B. Gurdon y Shinya Yamanaka premio Nobel de Medicina por estudios con células madre
- Por sus trabajos con células pluripotentes en medicina regenerativa
- Están considerados como los "padres" de la reprogramación celular
Todos partimos de una única célula, el resultado de unir un óvulo y un espermatozoide. Está única célula se va multiplicando y generando células inmaduras que tienen la capacidad de producir todas las distintas células de un organismo, desde neuronas hasta las células de los huesos o la piel. Estas células inmaduras se llaman células madre pluripotenciales. Los trabajos de John B. Gurdon y Shinya Yamanaka demostraron que la dirección opuesta también era posible: las células adultas pueden reprogramarse para convertirse en células inmaduras capaces de generar células de cualquier tejido.
Estos descubrimientos suponen que podemos generar todo tipo de células a
partir no solo de células madre embrionarias sino de células maduras.
Estas células ayudan a comprender el mecanismo de desarrollo y ofrecen la oportunidad
de nuevas terapias médicas.
http://www.taringa.net/posts/ciencia-educacion/15733040/Premio-Nobel-de-Medicina-2012.html
(OPINION
PROPIA)
El trabajo realizado por los científicos demuestra que se pueden usar células
maduras para reprogramarlas y poderlas utilizar para terapias de regeneración a
nivel interior (tejidos, órganos, etc.).
Este descubrimiento como anteriormente se comento tiene gran
trascendencia para la medicina, debido a su gran impacto en la regeneración celular,
y todo gracias a que se pueden reprogramar las células especializadas y
moldearlas para que puedan formar parte del organismo pero en diferente elongación,
como por ejemplo los órganos dañados de un individuo, para curar problemas de (Halds
haimer) y regenerar mayor neuronas. Gracias a este método se evitaran
problemas éticos en la sociedad por la utilización de células madres a partir
de los embriones y facilita a la medicina progresar rápidamente en el futuro.
- Extra
ANTECEDES DE LOS PROYECTOS DE
JOHN B. GURDON (1962) Y SHINYA TAMANAKA (2006)
John B. Gurdon en 1962 realizó un experimento determinante. Supuso con razón que en el genoma de una célula adulta sigue existiendo la información para convertirse en cualquier célula. Reemplazó el núcleo del huevo de una rana con el núcleo de una célula del intestino, ya madura. El huevo se desarrolló normalmente y produjo una rana normal. El núcleo de la célula adulta no había perdido la capacidad de generar todo tipo de células y había sido reprogramado al insertarse en un huevo.
En 2006 Shinya Yamanaka, más de 40 años después realizó otro experimento trascendental. Trató de averiguar qué genes hacían que las células madre permanecieran inmaduras. Después de varios intentos encontró que solo 4 genes lo conseguían. Tomaron células del tejido conectivo, fibroblastos, e introdujeron en ellas los genes hallados. Al hacerlo habían reprogramado el fibroblasto maduro en una célula madre pluripotencial inducida. Ahora esta célula podía generar todo tipo de células como neuronas u otros fibroblastos. Una de las ventajas fundamentales de este trabajo es que no es necesario recurrir a embriones para lograr células madre, algo que plantea problemas éticos en determinados ámbitos.
Bibliografía
- http://aipuchile.wordpress.com/2012/10/08/premio-nobel-en-fisiologia-o-medicina-2012-por-el-descubrimiento-que-las-celulas-maduras-pueden-ser-reprogramadas-para-convertirse-en-pluripotenciales/
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