Instrucciones para su uso.
Cuando el autoclave se usa con
vapor saturado a presión superior a la normal se deben seguir los siguientes
pasos:
1.
Colocar
agua en la caldera procurando que su nivel no alcance a los objetos que se
colocarán en su interior. AL material a esterilizar sólo le debe llegar el
vapor que es el agente esterilizante.
2.
Cargar
el material a esterilizar debidamente acondicionado.
3.
Cerrar el autoclave ajustando
los tornillos de su tapa en posición cruzada, a fin de asegurar un cierre
parejo y hermético. De ésta manera se prolonga la vida útil de la junta de
siliconas, cuyo espesor debe ser homogéneo en todo el recorrido.
4.
Abrir
la salida de vapor y encender la fuente de calor.
5.
Asegurarse
el correcto estado de la válvula de seguridad.
6.
La
salida de vapor debe estar abierta para desalojar el aire interior, hasta que
salga un chorro continúo y abundante de vapor. La temperatura de trabajo, 121°C
se alcanzará a la presión de una atmósfera sobre la normal solo si dentro del
autoclave existe vapor en equilibrio con el agua, por lo cual es necesario
asegurar la eliminación de aire del interior de la caldera. Si no se logra la
adecuada eliminación del aire, la presencia de aire mezclado con vapor de agua
resultara en una temperatura inferior a 121°C. De lo dicho se deduce que el
manómetro podrá marcar una atmósfera de sobrepresión, pero si no se ha
efectuado una correcta eliminación de aire la temperatura será inferior a la
esperada.
7.
Purgar
el aparato: se cierra y se abre tres veces la llave de salida de vapor, para
eliminar los restos de aire.
8.
Cerrar.
Calentar hasta que el manómetro indique la presión deseada. Regular la fuente
de calor para mantener la presión constante. A partir de ese momento comenzar a
contar el tiempo de esterilización.
El tiempo de exposición varía con el volumen de los
líquidos contenidos en distintos recipientes:
|
RECIPIENTE
|
VOLUMEN
(ml)
|
TIEMPO
DE EXPOSICIÓN
(min)
|
|
Vaso de precipitado
|
20
|
12-14
|
|
Matraz erlenmeyer
|
50
|
12-14
|
|
Matraz erlenmeyer
|
200
|
12-15
|
|
Matraz erlenmeyer
|
1000
|
20-25
|
|
Matraz erlenmeyer
|
2000
|
30-35
|
Una vez transcurrido el tiempo de tratamiento, apagar la
fuente de calor y esperar que el manómetro marque cero. Recién en ese momento
se puede abrir la llave de salida de vapor y luego la tapa del autoclave para
retirar el material.
Bibliografía
www.biol.unlp.edu.ar/microbiologiagral/anexo-lab2esterilizacion.doc
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