2.3.1 ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO DE TEJIDOS
El cultivo in
vitro consiste en tomar una porción de una planta (a la que se denominará
explanto, como por ej. el ápice, una hoja o segmento de ella, segmento de
tallo, meristema, embrión, nudo, semilla, antera, etc.) y colocarla en un
medio nutritivo estéril (usualmente gelificado,
semisólido) donde se regenerarán una o muchas plantas.
La formulación
del medio cambia según se quiera obtener un
tejido des diferenciado (callo), crecer yemas y raíces, u obtener
embriones somáticos para producir semillas artificiales.
El éxito en la
propagación de una planta dependerá de la posibilidad de expresión de la
potencialidad celular total, es decir,
que algunas células recuperen su
condición meristemática. A tal fin, debe inducirse primero la des
diferenciación y luego la
rediferenciación celular. Un
proceso de este tipo sucede durante la formación de las raíces adventicias en
el enraizamiento de estacas, la formación de yemas adventicias, o cuando se
busca la propagación de begonias, violeta africana (ver figura 1) opeperonias
mediante porciones de hojas. Uno de los factores más importantes a tener en
cuenta para lograr la respuesta morfogenética deseada es la composición del
medio de cultivo.
PASOS NECESARIOS PARA GENERAR PLANTAS A PARTIR DE EXPLANTOS AISLADOS (Incluye los puntos 2.3.1.1 - 2.3.1.2 - 2.3.1.3 - 2.3.1.4)
En los
protocolos utilizados durante el cultivo
in vitro se pueden distinguir las siguientes etapas
(sintetizadas en la Figura 3):
2.3.1.0 ELECCIÓN de la planta y/o tejido donante
de explantos.
Características:
1.- Sanidad
2.- Que sean plantas herbáceas
3.- Edad del explante
4.- Genotipo5.- Época del año
6.- Edad de la planta
7.- Efecto posición y competencia
2.3.1.1 ESTABLECIMIENTO, que consiste en la
desinfección de los explantos (generalmente con hipoclorito de sodio) y su
posterior adaptación al medio artificial
de modo de inducir callo, brote, raíz o embrión
somático según se desee.
2.3.1.2 MULTIPLICACIÓN, para generar una masa vegetal suficiente para la
regeneración del número de plantas
necesarias.
2.3.1.3 ENRAIZAMIENTO, en la que se busca la formación de
raíces con el fin de convertir los brotes o embriones somáticos en plántulas completas.
2.3.1.4 RUSTICACIÓN, que es la aclimatación
de las plántulas obtenidas in vitro a las
condiciones ambientales ex vitro (suelo o algún sustrato inerte).
El éxito de la
técnica depende de muchos factores, entre ellos la edad de la planta (a mayor
edad, menor potencial de regeneración),
el genotipo y las condiciones ambientales. Entre las ventajas del cultivo in
vitro de material vegetal, se pueden incluir los tiempos más cortos, y la posibilidad
de ocupar un espacio mucho más pequeño que si se desea propagar material en tierra.
BIBLIOGRAFIA:
- http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Cultivos%20celulares%20II%20Euge.pdf
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